期刊简介

               本刊是卫生部主管,由中国麻风防治协会和山东省皮肤病发病防治研究所主办的国家科技期刊;是中国科技核心期刊、科技论文统计源期刊、是皮肤病与性病学类中文核心期刊。                

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  • 杂志名称:中国麻风皮肤病杂志
  • 主管单位:中华人民共和国卫生部
  • 主办单位:中国麻风防治协会;山东省皮肤病性病防治研究所
  • 国际刊号:1009-1157
  • 国内刊号:37-1348/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:皮肤病学和性病学类中文核心期刊期刊收录:国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 维普收录(中), 上海图书馆馆藏, 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊)
中国麻风皮肤病杂志2006年第06期

人乳头瘤病毒6b型早期蛋白E6和E7基因的克隆及表达

王群;毕志刚;张兆松

关键词:尖锐湿疣, 人乳头瘤病毒6b型, 基因克隆, 表达
摘要:目的:从尖锐湿疣(CA)标本中克隆出人乳头瘤病毒6b型(HPV-6b)早期蛋白E6、E7基因,并进行序列分析比对及原核表达,为HPV感染的检测和基因工程疫苗研究奠定基础.方法:用PCR法,从CA标本中扩增HPV-6的E6、E7基因,构建pUC/HPV-6 E6、pUC/HPV-6 E7两个重组体,酶切鉴定及测序分析比对.经双酶切与表达载体pGEX-5X-1定向连接,构建pGEX-5X-1重组表达质粒,转入BL21大肠杆菌,IPTG诱导GST融合蛋白表达及Western blot鉴定.结果:克隆出HPV-6b早期蛋白E6、E7基因,成功构建pUCm/HPV-6b E6、pUCm/HPV-6b E7重组质粒,克隆获得HPV-6b E6、E7基因与GenBank标准株序列完全相同,经双酶切定向克隆,成功构建重组表达质粒pGEX-5X-l/HPV-6b E6和pGEX-5X-l/HPV-6b E7,转入BL21大肠杆菌,高效表达GST融合蛋白.结论:本研究克隆出的HPV-6b E6、E7基因与标准株相同,HPV-6b E6、E7 GST融合蛋白获得高效表达,为HPV-6b E6、E7基因表达产物的纯化、体外活性以及E6、E7为靶位的基因疫苗研究奠定基础.